谁知道激素在培养基中扩散的速度
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发布时间:2009-02-16 12:58:06
>>>>>>>>提问MS培养基,我要在上层加液体 做个实验,怕培养基中加的 如6-BA ,NAA等激素扩散到液体中产生影响,请教高手激素在琼脂形成的培养基中扩散的速度,及琼脂凝结形成孔径大小,谢谢。
休 闲居 编 辑
>>>>>>>>休闲养生网回答:琼脂
在固体培养时琼脂是最好的固体剂。它最主要的作用是使液体培养基凝固,有一些报告提到采用滤纸、玻璃球、玻璃棉、石英沙、蛭石、明胶、硅胶、丙烯酰胺、泡沫塑料、甚至南瓜、马铃薯等来代琼脂,然而直到目前为此,比琼脂更方便和更好的支持物仍未发现。顺便提到,琼脂本身并不提供任何营养,它是一种高分子的碳水化合物,从红藻等海藻中提取,仅溶解于热水,成为溶胶,冷后(40°C以下)即凝固为固体状成凝胶。通常所说的“煮”培养基,就是使琼脂溶解于热水(90°C以上)中。
琼脂的用量一般在4—10/1之间。新买来的琼脂要先试一下它的凝固能力,一般只要它能稳定地凝固住就不要多加。通常培养室温度较低时可适当少放一点,温度高时要多放一点。琼脂以颜色浅,透明度好,洁净的为上品。近来有些厂家生产琼脂粉,它比条状的使用更方便。同一厂家的产品,往往粉状的比条状的用量要少。在避免“玻璃化现象”(vitrification)时,常增加琼脂用量。
加入琼脂所做成的固体培养基有不少优点,如操作简便,对培养物的支持、通气较易解决。便于经常观察研究等。但也有其缺点,如培养物于培养基的接触(即吸收)面积小,各中养分与激素在琼脂中扩散较慢,并且各自扩散速度不同,使养分的补充慢,成分比例上有变化,同时培养物排出的一些代谢废物,聚集在吸收表面上,浓度高,抑制组织的代谢活性,加之琼脂不可避免含有杂质,这样就使培养物在固体培养基上的生长速度显著低于在液体培养基中的速度。
琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工厂方式等有关外,还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关,长时间的高温会使凝固能力下降,过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解,而丧失凝固能力存放时间过久, 琼脂变褐,也会逐渐失去凝固能力。
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